El control de Legionella sigue siendo una prioridad para la salud pública. Tras la entrada en vigor de la Directiva (UE) 2020/2184 sobre la calidad de las aguas destinadas al consumo humano, la normativa europea puso el foco en la gestión del riesgo y la prevención de brotes asociados a esta bacteria. En España, esta directiva se ha adaptado a través del Real Decreto 487/2022, que desde enero de 2023 regula los requisitos sanitarios para la prevención y el control de la legionelosis.
Índice
El Real Decreto 487/2022 ha supuesto un cambio de paradigma respecto a los controles y las estrategias de prevención por parte de las empresas para poder controlar y evitar la dispersión y multiplicación de este patógeno en sus instalaciones, reuniendo medidas clave como:
El proceso de detección de Legionella comienza con una adecuada toma de muestras, un paso crítico para obtener resultados fiables en el análisis. Para ello, es imprescindible contar con botellas estériles de 1L con tiosulfato sódico, cuya función es neutralizar el cloro presente en el agua y evitar falsos negativos en el cultivo microbiológico.
Además, en el momento de la recogida de la muestra, es fundamental medir una serie de parámetros fisicoquímicos que pueden influir en la supervivencia de Legionella y en la efectividad de los biocidas empleados en el sistema.
>> Para conocer en detalle los valores de referencia, la frecuencia de control recomendada y los equipos disponibles para cada parámetro, puedes consultar la Guía de Interpretación del Real Decreto 487/2022.
Una vez recogidas las muestras, deben conservarse entre 2 y 8ºC y enviarse al laboratorio para su análisis en un plazo máximo de 48 horas desde la toma de muestra.
En el análisis de Legionella, tanto por cultivo como por PCR, es fundamental un correcto proceso de filtración.
Según la ISO 11731:2017, se requiere filtrar entre 100 y 1000 mL de agua a través de una membrana de 0,2 µm y/o 0,45 µm, un paso clave para la recuperación de la bacteria.
Según la ISO 12869 de detección y cuantificación de Legionella por PCR es necesario filtrar al menos 50 mL (cuánto más volumen, mejor límite de detección se obtendrá) de agua a través de un filtro de membrana de policarbonato con un tamaño de poro de 0,45 µm o menos. No se pueden utilizar filtros que contengan celulosa o fibra de vidrio.
En el laboratorio, existen distintos métodos para la detección de Legionella:
El análisis de Legionella según la norma ISO 11731:2017, es un proceso minucioso que requiere entre 7 y 10 días para la obtención de resultados. Este método implica distintas etapas, desde la filtración y el tratamiento de la muestra hasta la incubación en medios selectivos y la confirmación de las colonias aisladas.
Según el Anexo J de la norma, la elección de los medios de cultivo dependerá del tipo de muestra y de la carga bacteriana presente. Entre los materiales utilizados en este proceso se encuentran:
Es importante tener en cuenta que el éxito del análisis depende de la correcta aplicación de cada paso del protocolo.
Algunos aspectos clave a tener en cuenta incluyen:
Una alternativa eficiente y rápida al método ISO (que requiere entre 10 y 12 días para obtener resultados) es el uso de la PCR en tiempo real, que permite obtener resultados en apenas 3 – 4 horas.
El análisis por PCR consiste en:
1.Concentración de la muestra por filtración
✔ Reducción del tiempo de respuesta: los resultados están disponibles en pocas horas, frente a los días o semanas que requiere el cultivo.
✔ Mayor sensibilidad: permite detectar incluso bajas concentraciones de la bacteria.
✔ Fiabilidad en muestras complejas: apto en distintos tipos de agua, incluidas las más turbias o aquellas que no se pueden fitrar.
✔ Información cuantitativa: ofrece datos precisos sobre la carga bacteriana, lo que facilita la toma de decisiones en la gestión del riesgo.
✔ Posibilidad de de detectar y discriminar en un único ensayo tanto Legionella spp. como L. pneumophila y L. pneumophila serogrupo 1.
Mientras los métodos de cultivo continúan siendo esenciales para la confirmación oficial y la cuantificación precisa, las técnicas de PCR en tiempo real se posicionan como una herramienta clave para una detección temprana y rápida, facilitando una respuesta preventiva inmediata, antes de que se materialicen los riesgos.
Es importante participar en ensayos de intercomparación para garantizar la calidad de los resultados de los análisis.
Las herramientas de detección de Legionella descritas a lo largo del artículo permiten a los laboratorios de análisis integrar tecnologías avanzadas en sus estrategias de control, minimizando riesgos y garantizando entornos seguros.
En Bioser acompañamos a los laboratorios de análisis en la adaptación a estos requisitos normativos, ofreciendo una gama completa de soluciones para el análisis de Legionella en todo tipo de aguas, desde los medios de cultivo según ISO 11731:2017, hasta métodos de detección por PCR en tiempo real, pasando por todo el material necesario para poder cumplir con la normativa vigente.
En Bioser trabajamos cada día para ofrecer soluciones eficaces, fiables y adaptadas a las exigencias normativas más actuales. Nuestro compromiso con la innovación, la salud pública y la seguridad alimentaria nos impulsa a seguir evolucionando junto a nuestros clientes, ayudándoles a cumplir con las normativas y protegiendo a las personas frente a amenazas como la Legionella.
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