SENSISpec ELISA Lisozima

Aplicaciones principales

• Determinación de lisozima en vino: permite detectar y cuantificar niveles muy bajos de residuos de lisozima en muestras de vino.
• Determinación de lisozima en queso: indicado para la cuantificación de residuos de lisozima en productos queseros.
• Control de alérgenos: permite verificar la presencia de lisozima, una proteína de la clara de huevo con potencial alergénico, en alimentos.
• Control de procesos: adecuado para verificar posibles residuos derivados del uso de lisozima durante la elaboración de determinados alimentos y bebidas.
• Control de contaminaciones cruzadas: su elevada sensibilidad permite incorporarlo a programas de control destinados a detectar la presencia no intencionada de lisozima.

Especificaciones técnicas

• Producto: SENSISpec ELISA Lysozyme.
• Fabricante: Gold Standard Diagnostics.
• Referencia: HU0030012.
• Analito: lisozima.
• Tipo de ensayo: inmunoensayo enzimático ELISA cuantitativo.
• Principio: ELISA tipo sándwich.
• Formato: placa de microtitulación de 96 pocillos.
• Tiempo total de incubación: 60 minutos (20 + 20 + 20 minutos).
• Detección: 450 nm mediante HRP + TMB.
• Longitud de onda de referencia: 620 nm.
• Estándares: 0, 25, 50, 100 y 250 ppb de lisozima.
• Rango de cuantificación en vino: 25-250 ppb.
• Límite de detección en vino: 2 ppb.
• Límite de cuantificación en vino: 25 ppb.
• Límite de detección en otras matrices: 10 ppb aplicando el procedimiento de preparación correspondiente.
• Límite de cuantificación en otras matrices: 125 ppb aplicando el procedimiento de preparación correspondiente.
• Recuperación: 99 % en vino y 85 % en queso.
• Precisión intraensayo: 2-6 %.
• Precisión interensayo: 2-3 %.
• Linealidad de dilución: 87-98 % en muestras fortificadas de vino blanco, vino tinto y queso.
• Almacenamiento: 2-8 °C.

Instrucciones para su uso

1. Llevar todos los reactivos a temperatura ambiente (20-25 °C) antes de iniciar el ensayo y mézclalos suavemente sin generar espuma.
2. Preparar las muestras siguiendo el procedimiento específico para la matriz que se va a analizar. La preparación de vino difiere de la utilizada para queso y otras muestras.
3. Pipetear 100 µl de los estándares o de las muestras preparadas en los pocillos correspondientes. El fabricante recomienda realizar las determinaciones por duplicado.
4. Incubar durante 20 minutos a temperatura ambiente.
5. Lavar la placa tres veces con 300 µl de solución de lavado diluida por pocillo.
6. Añadir 100 µl de conjugado anti-lisozima-peroxidasa a cada pocillo e incuba durante otros 20 minutos a temperatura ambiente.
7. Realizar un segundo ciclo de lavado y añade 100 µl de solución de sustrato a cada pocillo.
8. Incubar durante 20 minutos en oscuridad a temperatura ambiente.
9. Añadir 100 µl de solución de parada para detener la reacción.
10. Medir la absorbancia a 450 nm, utilizando 620 nm como longitud de onda de referencia.
11. Calcular la concentración de lisozima mediante la curva de calibración obtenida con los estándares y aplica, cuando corresponda, los factores de dilución establecidos para la preparación de la muestra.

La preparación de la muestra depende de la matriz analizada. Seguir siempre las instrucciones de uso oficiales del SENSISpec ELISA Lysozyme y aplicar los factores de dilución correspondientes para calcular correctamente el resultado.

Beneficios de elegir este ensayo

• Detecta niveles muy bajos de lisozima
• Obtén resultados cuantitativos
• Especialmente adaptado al control en vino
• Aplicable también a queso y otros alimentos
• Buen rendimiento analítico
• Alta precisión
• Control cuantitativo de alérgenos
• Formato estándar ELISA

Preguntas frecuentes

¿Qué detecta el SENSISpec ELISA Lysozyme?

El ensayo está diseñado para la detección y cuantificación de lisozima en alimentos. Se destaca especialmente su aplicación para residuos de lisozima en vino y queso.

¿La lisozima es un alérgeno?

La lisozima es una proteína presente en la clara de huevo y puede representar un riesgo para las personas alérgicas al huevo. Por este motivo, su presencia residual puede ser relevante dentro de los programas de gestión de alérgenos.

¿Por qué puede encontrarse lisozima en vino o queso?

La documentación del fabricante indica que la lisozima se utiliza principalmente como conservante en las industrias vitivinícola y quesera. El ensayo permite comprobar y cuantificar posibles residuos presentes en el producto.

¿El resultado es cualitativo o cuantitativo?

Es un ensayo cuantitativo. La concentración de lisozima se determina comparando la absorbancia de la muestra con una curva de calibración obtenida mediante los estándares incluidos.

¿Cuál es el límite de detección?

El límite de detección depende de la preparación de la muestra. Es de 2 ppb para vino y 10 ppb para otras matrices utilizando los procedimientos de preparación especificados por el fabricante.

¿Cuál es el rango de cuantificación?

Para vino, el rango de cuantificación es de 25 a 250 ppb. Para otras matrices, el fabricante establece un LOQ de 125 ppb y deben tenerse en cuenta los factores de dilución correspondientes.

¿Cuánto dura el ensayo?

El procedimiento incluye tres incubaciones de 20 minutos, lo que supone un tiempo total de incubación de 60 minutos, además del tiempo necesario para preparación de muestras, pipeteo, lavados y lectura.

¿A qué longitud de onda se realiza la lectura?

La absorbancia se mide a 450 nm, utilizando una longitud de onda de referencia de 620 nm.

¿Qué estándares incluye?

El kit incluye estándares listos para usar de 0, 25, 50, 100 y 250 ppb de lisozima.

¿Se necesita un lector ELISA?

Sí. Para realizar la lectura cuantitativa es necesario disponer de un lector ELISA capaz de medir la absorbancia a 450 nm. El fabricante indica 620 nm como longitud de onda de referencia.

¿La preparación de la muestra es igual para vino y queso?

No. El fabricante establece un procedimiento específico para vino y otro para queso y el resto de matrices. En estas últimas se requiere homogeneización, extracción, incubación y centrifugación antes de aplicar la muestra al ensayo.

¿Cuántas determinaciones permite realizar?

La referencia HU0030012 corresponde al formato de 96 pocillos. La placa está formada por 12 tiras de 8 pocillos separables, lo que permite adaptar el número de pocillos utilizados a cada sesión de trabajo.

¿Cómo debe conservarse el kit?

Todos los reactivos deben almacenarse a una temperatura de 2-8 °C. La fecha de caducidad específica se indica en las etiquetas de los reactivos y en el envase exterior.