Kit de ensayo de fibra dietética

Aplicaciones principales

• Determinación de fibra dietética total (TDF) mediante un procedimiento enzimático-gravimétrico.
• Determinación diferenciada de fibra dietética soluble (SDF) e insoluble (IDF) siguiendo el procedimiento correspondiente.
• Análisis de materias primas y alimentos procesados, incluidos cereales y productos derivados, frutas y verduras.
• Aplicación en laboratorios de análisis de alimentos y control de calidad que empleen los métodos AOAC y AACC contemplados para este kit.
• El kit está reconocido para AACC 32-05.01, 32-06.01, 32-07.01 y 32-21.01; AOAC 985.29, 991.42, 991.43 y 993.19. La documentación actual del fabricante también indica CODEX Method Type I y GB Standard 5009.88-2014.

Especificaciones técnicas

• Referencia del fabricante: K-TDFR-100A.
• Presentación: reactivos para 100 determinaciones.
• Analito: fibra dietética.
• Formato del ensayo: enzimático.
• Método de detección: gravimétrico.
• Límite de detección indicado por el fabricante: 0,5 g/100 g.
• Tiempo total de ensayo indicado por el fabricante: aproximadamente 100 minutos.
• Contenido enzimático: 10 mL de α-amilasa termoestable E-BLAAM, aproximadamente 3.000 U/mL mediante el método Ceralpha y aproximadamente 10.000 U/mL sobre almidón soluble; 10 mL de proteasa purificada E-BSPRT, 50 mg/mL y aproximadamente 350 unidades de tirosina/mL; y 20 mL de amiloglucosidasa purificada E-AMGDF, 3.300 U/mL sobre almidón soluble.
• La amiloglucosidasa E-AMGDF está descrita como esencialmente libre de actividad celulasa contaminante, ayudando a evitar la solubilización y consiguiente subestimación del β-glucano.
• Los tres enzimas se suministran en forma líquida estabilizada y lista para usar.
• Conservación a corto plazo indicada actualmente por el fabricante: 2-8 °C. Para conservación a largo plazo deben consultarse las etiquetas de cada componente.
• Estabilidad: superior a 2 años bajo las condiciones de almacenamiento recomendadas.

Instrucciones para el uso adecuado

1. Preparar las muestras por duplicado. Para el procedimiento de determinación de fibra dietética total, soluble e insoluble basado en AOAC 991.43/AACC 32-07.01, pesar 1,000 ± 0,005 g de muestra seca en vasos adecuados y realizar dos blancos junto con las muestras.
2. Añadir 40 mL de tampón MES-TRIS, 0,05 M de cada componente y pH 8,2, y dispersar completamente la muestra mediante agitación magnética.
3. Añadir 50 µL de α-amilasa termoestable e incubar a 98-100 °C durante 30 minutos con agitación continua.
4. Enfriar hasta 60 °C, añadir 100 µL de proteasa e incubar a 60 ± 1 °C durante 30 minutos con agitación continua.
5. Añadir 5 mL de HCl 0,561 N y comprobar que el pH se encuentra entre 4,1 y 4,8. Añadir posteriormente 200 µL de amiloglucosidasa e incubar a 60 °C durante 30 minutos con agitación constante.
6. Para fibra dietética total, precipitar la fibra añadiendo cuatro volúmenes de etanol al 95 % previamente calentado a 60 °C, aproximadamente 225 mL en las condiciones descritas, y dejar formar el precipitado durante 60 minutos a temperatura ambiente.
7. Para determinar por separado las fracciones insoluble y soluble, filtrar primero el residuo insoluble y lavar con agua destilada caliente; utilizar conjuntamente el filtrado y los lavados para precipitar posteriormente la fibra soluble con cuatro volúmenes de etanol al 95 % a 60 °C.
8. Filtrar los residuos utilizando crisoles con Celite, realizar los lavados con los disolventes especificados en el procedimiento y secar. Determinar proteína en uno de los residuos duplicados y cenizas en el otro para efectuar las correcciones gravimétricas requeridas por el método.

Ventajas de elegir Megazyme

• Enzimas de alta pureza y actividad estandarizada específicamente documentadas para la determinación de fibra dietética.
• α-Amilasa termoestable, proteasa y amiloglucosidasa suministradas en formato líquido estabilizado y listo para usar.
• Amiloglucosidasa E-AMGDF esencialmente libre de celulasa; la documentación técnica señala que la contaminación por esta actividad en otras preparaciones puede provocar una subestimación del β-glucano.
• Compatibilidad documentada con diferentes métodos AOAC y AACC para la determinación de fibra dietética.
• Posibilidad de determinar fibra dietética total o separar las fracciones soluble e insoluble mediante los procedimientos descritos.
• Disponibilidad de la herramienta Mega-Calc™ del fabricante para facilitar el procesamiento de los datos del ensayo.

Preguntas frecuentes

¿Qué determina el kit K-TDFR-100A? Permite determinar fibra dietética total y, siguiendo el procedimiento específico documentado, fibra dietética soluble e insoluble.

¿Para qué tipos de muestras está indicado? El método está descrito para alimentos y materias primas, incluidos cereales y productos derivados, frutas y verduras.

¿Qué enzimas incluye el kit? La presentación K-TDFR-100A incluye α-amilasa termoestable E-BLAAM, proteasa purificada E-BSPRT y amiloglucosidasa purificada E-AMGDF en cantidades suficientes para 100 determinaciones.

¿Qué métodos reconoce el fabricante para este producto? Megazyme indica AACC 32-05.01, 32-06.01, 32-07.01 y 32-21.01; AOAC 985.29, 991.42, 991.43 y 993.19, además de CODEX Method Type I y GB Standard 5009.88-2014.

¿Cómo se obtiene el resultado de fibra dietética? El procedimiento se basa en digestiones enzimáticas secuenciales y determinación gravimétrica del residuo. El resultado se corrige teniendo en cuenta proteína, cenizas y blanco según los cálculos establecidos en el método.