a-Amilasa (Bacillus licheniformis)

Aplicaciones principales

• Determinación de fibra dietética total mediante métodos analíticos compatibles de Megazyme.
• Hidrólisis enzimática del almidón en muestras alimentarias.
• Preparación de muestras para análisis de carbohidratos y polisacáridos.
• Investigación de la actividad alfa-amilasa en ensayos bioquímicos.
• Estudios de licuefacción y degradación enzimática del almidón.
• Desarrollo y validación de procedimientos analíticos que requieran alfa-amilasa bacteriana.
• Tratamiento de muestras en métodos que requieran actividad enzimática a pH 6,5 o superior.
• Aplicaciones de investigación alimentaria, bioquímica y control de calidad.

Especificaciones técnicas

• Producto: alfa-amilasa de Bacillus licheniformis.
• Marca: Megazyme / Neogen.
• Referencia: E-BLAAM-100ML.
• Tipo: preparación enzimática de alta pureza.
• Origen: Bacillus licheniformis.
• Obtención: enzima no recombinante.
• Clasificación enzimática: EC 3.2.1.1.
• Familia CAZy: GH13.
• Números CAS: 9000-90-2 / 9000-85-5.
• Función: endohidrólisis de enlaces α-1,4-D-glucosídicos del almidón.
• Forma física: solución líquida estabilizada.
• Volumen suministrado: 100 ml.
• Actividad nominal con reactivo Ceralpha: 3000 U/ml a pH 6,5 y 40 °C.
• Actividad nominal total: 300000 U, calculadas para 100 ml.
• Actividad aproximada sobre almidón soluble: 10000 U/ml a pH 6,5 y 40 °C.
• Actividad específica de referencia: aproximadamente 54-55 U/mg de proteína, según el ensayo y el lote.
• pH óptimo: 6,0-6,5.
• Intervalo de estabilidad de pH: 4,5-8,0.
• Temperatura óptima: 75 °C.
• Estabilidad térmica indicada: inferior a 80 °C.
• Conservación: refrigerada entre 2 y 8 °C; temperatura recomendada de 4 °C.
• Transporte: a temperatura ambiente, según la información comercial de Neogen.
• Masa molecular aproximada: 58000 Da.
• Punto isoeléctrico aproximado: 7,4.
• Pureza electroforética: una banda principal en SDS-PAGE y enfoque isoeléctrico.
• Actividad celulasa: prácticamente ausente.
• Actividad catalasa: ausente, según el fabricante.
• Actividad amiloglucosidasa: no detectable en el certificado de análisis consultado.
• Aplicación recomendada: procedimientos analíticos de fibra dietética total.
• Estabilidad comercial: Neogen indica más de 4 años a 4 °C; prevalece la caducidad del lote suministrado.
• Presentación: 1 envase de 100 ml.
• Certificado de análisis: disponible por lote.
• Ficha de datos de seguridad: disponible.

Instrucciones para su uso

1. Consultar la ficha técnica oficial y el protocolo analítico correspondiente.
2. Verificar que la referencia del envase sea E-BLAAM-100ML.
3. Comprobar el número de lote y la fecha de caducidad.
4. Revisar el certificado de análisis para conocer la actividad del lote.
5. Conservar el producto entre 2 y 8 °C, preferentemente a 4 °C.
6. Preparar las muestras, tampones y reactivos necesarios.
7. Seleccionar las condiciones de pH y temperatura especificadas por el método.
8. Calcular la dosis de enzima a partir de la actividad nominal de 3000 U/ml.
9. Atemperar únicamente la cantidad de reactivo necesaria cuando el protocolo lo requiera.
10. Homogeneizar suavemente la solución enzimática si procede.
11. Pipetear el volumen requerido con material adecuado.
12. Añadir la alfa-amilasa a la muestra siguiendo el orden indicado por el método.
13. Ajustar las condiciones de reacción al procedimiento validado.
14. Incubar durante el tiempo establecido para la digestión enzimática.
15. Controlar la temperatura y el pH durante el tratamiento.
16. Detener la reacción o continuar con la siguiente etapa según el protocolo.
17. Procesar la muestra tratada para el análisis posterior.
18. Registrar la cantidad de enzima utilizada y las condiciones del ensayo.
19. Evitar la contaminación del contenido del envase original.
20. Cerrar inmediatamente el recipiente después de su utilización.
21. Devolver el envase a refrigeración entre 2 y 8 °C.
22. Gestionar los residuos siguiendo la ficha de seguridad y las normas del laboratorio.

Beneficios de elegir la alfa-amilasa E-BLAAM-100ML de Neogen

• Actividad nominal definida de 3000 U/ml con reactivo Ceralpha.
• Presentación de 100 ml con 300000 U nominales por envase.
• Enzima bacteriana no recombinante.
• Solución líquida estabilizada y lista para dosificar según el método.
• Alta pureza para ensayos bioquímicos y analíticos.
• Especialmente recomendada para métodos de fibra dietética total.
• pH óptimo de 6,0 a 6,5.
• Temperatura óptima de 75 °C.
• Estabilidad de pH entre 4,5 y 8,0.
• Actividad celulasa prácticamente ausente.
• Actividad catalasa ausente según el fabricante.
• Conservación refrigerada.
• Certificados de análisis disponibles para verificar las características de cada lote.
• Documentación técnica del fabricante disponible.

Preguntas frecuentes

¿Qué es E-BLAAM-100ML?

Es una preparación de alfa-amilasa de Bacillus licheniformis comercializada por Megazyme/Neogen en un envase de 100 ml.

¿Qué cantidad contiene?

La referencia E-BLAAM-100ML corresponde a 100 ml de solución enzimática estabilizada.

¿Cuál es su actividad enzimática?

Su actividad nominal es de 3000 U/ml, determinada con el reactivo Ceralpha a pH 6,5 y 40 °C.

¿Cuántas unidades enzimáticas contiene el envase?

Contiene nominalmente 300000 U, calculadas multiplicando 3000 U/ml por 100 ml.

¿Qué actividad presenta sobre almidón soluble?

El fabricante indica aproximadamente 10000 U/ml sobre almidón soluble a pH 6,5 y 40 °C.

¿Por qué existen dos valores de actividad?

Porque se utilizan sustratos diferentes. Los valores determinados con Ceralpha y almidón soluble no deben intercambiarse directamente.

¿Cuál es el origen de la enzima?

La enzima se obtiene de Bacillus licheniformis y es no recombinante.

¿Cuál es su clasificación enzimática?

Corresponde a EC 3.2.1.1 y pertenece a la familia CAZy GH13.

¿Para qué se utiliza principalmente?

Se recomienda para procedimientos analíticos de fibra dietética total y para investigación y análisis de carbohidratos.

¿Es adecuada para métodos Megazyme de fibra dietética?

Sí. Neogen la recomienda para estos procedimientos, especialmente cuando requieren actividad a pH 6,5 o superior.

¿Cuál es su pH óptimo?

El intervalo óptimo indicado es de pH 6,0 a 6,5.

¿En qué intervalo de pH es estable?

La ficha técnica indica estabilidad entre pH 4,5 y 8,0.

¿Cuál es su temperatura óptima?

La temperatura óptima indicada es de 75 °C.

¿Puede utilizarse a 40 °C?

Sí. La actividad nominal se determina a 40 °C, aunque su temperatura óptima es de 75 °C. Deben respetarse las condiciones del método.

¿Cómo debe conservarse?

Debe mantenerse refrigerada entre 2 y 8 °C. La ficha técnica recomienda 4 °C.

¿Necesita transporte refrigerado?

Neogen indica transporte a temperatura ambiente y conservación refrigerada después de la recepción.

¿Cuál es su vida útil?

Neogen indica una estabilidad superior a 4 años a 4 °C. La fecha de caducidad aplicable es la correspondiente al lote suministrado.

¿Contiene actividad celulasa?

El fabricante describe la preparación como prácticamente exenta de actividad celulasa.

¿Contiene actividad catalasa?

El fabricante indica que la preparación está libre de catalasa.

¿Contiene actividad amiloglucosidasa?

El certificado de análisis consultado indica que la actividad amiloglucosidasa no es detectable.

¿Se suministra en polvo?

No. Se suministra como solución líquida estabilizada.

¿Incluye certificado de análisis?

Neogen/Megazyme dispone de certificados de análisis específicos para cada lote.

¿Qué diferencia existe entre E-BLAAM-100ML y E-BLAAM-40ML?

Ambas referencias corresponden a la misma preparación enzimática de 3000 U/ml. E-BLAAM-100ML contiene 100 ml y E-BLAAM-40ML contiene 40 ml.

¿Qué diferencia existe entre E-BLAAM-100ML y E-BLAAM-A-100ML?

E-BLAAM-100ML contiene 100 ml a 3000 U/ml. E-BLAAM-A-100ML contiene 100 ml a 750 U/ml y está específicamente recomendada para el analizador de fibra dietética ANKOM TDF.