Foodproof Salmonella spp + S. enteritidis + S. typhimurium Lyokit LP

Aplicaciones principales

• Liberación rápida de lotes en productos cárnicos, avícolas, lácteos, cacao y especias.
• Detección en matrices complejas con posibles inhibidores, como productos lácteos, cacao, especias y muestras ambientales.
• Vigilancia epidemiológica y trazabilidad de brotes mediante la identificación simultánea de S. Enteritidis y S. Typhimurium.
• Validación de procesos de higienización y control de puntos críticos en industrias alimentarias.
• Análisis de muestras ambientales y de producción primaria.

Especificaciones técnicas

• Referencia de proveedor: KIT230134 (LP – Low Profile tubes)
• Tecnología: PCR en tiempo real (qPCR) liofilizada
• Objetivos de detección: Salmonella spp., S. Enteritidis, S. Typhimurium
• Volumen de reacción: 25 µL
• Número de reacciones: 96 por kit (máximo 94 muestras + controles)
• Canales de detección: FAM (S. Enteritidis), HEX (S. Typhimurium), ROX (Salmonella spp.), Cy5 (Control Interno)
• Almacenamiento: 2 a 8 °C, protegido de luz y humedad
• Tiempo hasta resultado: Horas (tras enriquecimiento)
• Protocolo de ciclaje térmico:
• Pre-incubación: 37 °C por 4 min, luego 95 °C por 5 min (1 ciclo)
• Amplificación: 95 °C por 5 s, 60 °C por 60 s (50 ciclos)
• Límites de detección (LOD50):
• S. Enteritidis en aves: 0.792 cfu/porción
• S. Enteritidis en ambiental: 1.040 cfu/porción
• S. Typhimurium en carne: 0.702 cfu/porción
• Salmonella spp. en carne: 0.728 cfu/porción
• Salmonella spp. en aves: 0.792 cfu/porción
• Salmonella spp. en ambiental: 0.570 cfu/porción
• Validaciones:
• Sensibilidad, especificidad y truenza relativas: 100% (todas las matrices)
• Certificación: NordVal International #055 (ISO 16140-2)
• Métodos de referencia: EN ISO 6579-1:2017 y 6579-3:2014
• Equipos compatibles: LightCycler® 480 II, LightCycler 96, Mx3005P®, AriaMx, ABI® 7500 fast, PikoReal™ 24, QuantStudio™ 5, CFX96™ Real-Time PCR Cycler

Instrucciones de preparación y uso

1. Enriquecimiento previo: Incubar la muestra en Buffered Peptone Water (BPW) a 37 °C durante 18-24 horas.
2. Extracción de ADN: Utilizar foodproof StarPrep Three Kit o StarPrep Three 8-Strip Kit para el aislamiento del ADN.
3. Preparación de la reacción: Reconstituir el reactivo liofilizado según las instrucciones del fabricante y añadir la muestra de ADN extraída.
4. Configuración del termociclador: Ajustar los canales de detección según los fluoróforos (FAM, HEX, ROX, Cy5), teniendo en cuenta la ausencia de fluoróforo pasivo.
5. Ciclaje térmico: Seguir el protocolo recomendado para pre-incubación y amplificación.
6. Interpretación de resultados: Analizar la discriminación de los tres objetivos genéticos y confirmar la validez del ensayo mediante el control interno.

Ventajas y beneficios clave

• Resultados rápidos, en pocas horas tras el enriquecimiento.
• Discriminación simultánea y específica de las variantes más relevantes de Salmonella.
• Formato liofilizado con UNG: seguridad y facilidad de manejo en laboratorio.
• Validaciones internacionales (ISO 16140-2, NordVal) y compatibilidad con múltiples termocicladores.

Preguntas frecuentes

¿Es necesario un paso de enriquecimiento previo?

Sí, se requiere incubar las muestras en BPW durante 18-24 horas antes de la extracción de ADN y la PCR.

¿Puedo utilizar el kit en matrices alimentarias complejas?

Sí, está validado y optimizado para su uso en matrices difíciles como lácteos, cacao, especias y muestras ambientales.

¿Qué controles incluye el kit?

Incluye un control interno de amplificación (Cy5) para asegurar la integridad y fiabilidad del ensayo.

¿Es compatible con mi equipo de PCR en tiempo real?

El kit es compatible con una amplia gama de termocicladores, incluyendo equipos Roche, Agilent, Thermo Scientific y Bio-Rad.

¿Se puede utilizar para diagnóstico clínico?

No, el kit está diseñado para aplicaciones de control de calidad y vigilancia alimentaria, no para diagnóstico en humanos.

¿Cómo se almacena el kit?

Debe mantenerse entre 2 y 8 °C, protegido de la luz y la humedad.