Salmonella Genus DNA Detection Kit RP

Aplicaciones principales

• Detección cualitativa de ADN de Salmonella spp. en muestras de producción primaria.
• Uso en programas de control microbiológico en producción avícola.
• Análisis de hisopos de bota, muestras fecales y muestras de polvo procedentes de granjas o entornos de producción.
• Apoyo a laboratorios veterinarios y de diagnóstico in vitro que requieren cribado rápido de Salmonella spp.
• Aplicación en procedimientos de verificación tras enriquecimiento de muestras según ISO 6579-1:2017.

Especificaciones técnicas

• Producto: vetproof® Salmonella qPCR LyoKit.
• Referencia: KIT230198.
• Formato: placa PCR separable en tiras de 8 tubos de perfil regular, precargada con 96 reacciones liofilizadas.
• Volumen final de reacción: 25 µL por reacción.
• Método: PCR a tiempo real para detección cualitativa de Salmonella spp.
• Canales de detección: FAM para Salmonella y VIC para control interno.
• Incluye cebadores, sondas de hidrólisis, control interno, Taq DNA polimerasa y Uracil-DNA Glycosylase (UNG) termolábil.
• Controles incluidos: control positivo de ADN estabilizado y agua grado PCR como control negativo.
• Compatibilidad: instrumentos de PCR en tiempo real aptos para detección de fluoróforos FAM y VIC.
• Almacenamiento: entre 2 y 8 °C.
• Preparación previa de muestra: enriquecimiento en agua peptonada tamponada durante 18 ± 2 horas a 37 ± 1 °C según ISO 6579-1:2017.
• Subcultivo selectivo recomendado para heces y muestras con alto contenido de suelo: caldo Mossel precalentado, 5 ± 0,5 horas a 37 ± 1 °C y 150 rpm.
• Programa de PCR: preincubación de 1 ciclo a 37 °C durante 4 minutos y 95 °C durante 5 minutos; amplificación de 50 ciclos a 95 °C durante 5 segundos y 60 °C durante 60 segundos.
• Interpretación: FAM positivo con Ct 10–50 indica positivo para Salmonella spp.; FAM negativo y VIC positivo con Ct 25–40 indica negativo; FAM negativo y VIC negativo indica resultado no válido.
• Validación: validado según DIN EN ISO 16140-2:2016 en laboratorio externo especializado.
• Uso previsto: solo para uso veterinario y solo para uso in vitro.

Instrucciones para el uso adecuado

1. Enriquecer la muestra relevante, como hisopo de bota, polvo o heces, en agua peptonada tamponada según el procedimiento indicado.
2. Extraer el ADN con un método adecuado para PCR compatible con este tipo de muestra.
3. Programar previamente el termociclador en tiempo real con los canales FAM para Salmonella y VIC para el control interno.
4. Retirar del envase de aluminio únicamente el número necesario de tiras de PCR y mantener el resto protegido de la luz y la humedad.
5. Añadir 25 µL de ADN de muestra a cada tubo con mezcla liofilizada; para el control negativo, añadir 25 µL de agua grado PCR, y para el control positivo, 25 µL del Control Template.
6. Sellar las tiras, resuspender completamente el pellet y centrifugar brevemente durante 5 segundos a aproximadamente 150 x g.
7. Introducir las tiras en el equipo de PCR en tiempo real e iniciar el programa especificado.
8. Interpretar los resultados verificando la señal de Salmonella en FAM y la validez analítica mediante el control interno en VIC.

Ventajas de elegir Hygiena

• Formato liofilizado listo para usar que simplifica la preparación del ensayo.
• Incluye control interno para detectar posibles inhibiciones y reducir falsos negativos.
• Suministro completo con controles positivo y negativo para la validación de cada corrida.
• Compatibilidad con equipos de PCR a tiempo real que trabajen con FAM y VIC.
• Validación conforme a DIN EN ISO 16140-2:2016.
• Diseñado para 96 reacciones, adecuado para rutinas analíticas de laboratorio.
• La referencia KIT230198 incorpora tiras de perfil regular para adaptarse a determinadas configuraciones instrumentales.

Preguntas frecuentes

¿Qué detecta este kit?

Detecta cualitativamente ADN de Salmonella spp. en muestras de producción primaria.

¿Qué tipos de muestra pueden analizarse?

La documentación indica su uso con hisopos de bota, heces y polvo de producción avícola, tras enriquecimiento previo.

¿Cuánto tarda el análisis por PCR?

El programa de PCR incluye 1 ciclo de preincubación y 50 ciclos de amplificación; además, la muestra requiere una etapa previa de enriquecimiento de 18 ± 2 horas.

¿Necesita equipo adicional?

Sí. Se requiere un termociclador de PCR a tiempo real compatible con FAM y VIC, así como un método de extracción de ADN y material auxiliar de laboratorio.

¿Cómo se interpreta un resultado negativo para Salmonella?

Un resultado se considera negativo cuando no hay señal en FAM y el control interno amplifica en VIC con Ct entre 25 y 40.