Reagent d 15 ml

Aplicaciones principales

• Detección de Vibrio en matrices alimentarias (compatible con formato KIT230003)
• Diferenciación precisa entre células vivas y muertas en muestras microbiológicas
• Prevención de falsos positivos en ensayos de PCR
• Análisis de Enterobacteriaceae en fórmulas lácteas infantiles
• Detección de Enterobacteriaceae, Salmonella, levaduras y mohos en productos lácteos
• Detección de Legionella en muestras ambientales
• Optimización de la extracción de ADN junto a kits foodproof® de Hygiena Diagnostics

Especificaciones técnicas

• Contenido: 3 botellas de 5 mL (total 15 mL)
• Estado físico: Fluido, incoloro, inodoro
• pH: 8 a 20 °C
• Densidad: 1 g/cm³ a 20 °C
• Punto de ebullición: > 100 °C
• Almacenamiento: Oscuridad, -15 a -25 °C hasta la fecha de caducidad
• Limitaciones de almacenamiento: Máximo 3 ciclos de congelación; no almacenar >7 días entre 2-8 °C
• Exposición a luz: Bombilla halógena 500W a 20 cm, 5 minutos, sobre hielo
• Equipos requeridos: foodproof® D-Light (MCH230039) o lámpara halógena + bloque de enfriamiento
• Certificaciones: DIN EN ISO 9001:2015, DIN EN ISO/IEC 17025; kits asociados validados según ISO 16140
• Limitaciones: Menor eficacia en muestras opacas o de color oscuro

Instrucciones para su uso

1. Preparación de la muestra: Homogeneizar el cultivo de enriquecimiento y dejar reposar 5–10 minutos.
2. Adición del reactivo: Pipetear 300 μL de Reagent D en un tubo transparente de 1,5 mL.
3. Transferencia de muestra: Añadir 100 μL de sobrenadante (o 50 μL si es muy turbio) al tubo con el reactivo y mezclar.
4. Incubación en oscuridad: Dejar reposar 5 minutos a temperatura ambiente.
5. Exposición a luz: Colocar los tubos a 20 cm de la bombilla halógena sobre hielo durante 5 minutos.
6. Centrifugación: 5 minutos a 8.000 × g (o 13.000 × g en cultivos claros). Usar perlas de látex si es necesario.
7. Eliminación del sobrenadante: Retirar cuidadosamente con pipeta, descartando e inactivando el sobrenadante.
8. Aislamiento de ADN: Procesar el pellet con un kit de aislamiento compatible como foodproof® DNA isolation.

Seguridad: Manipular siempre en oscuridad. Usar bata, guantes y desinfectar superficies. Potencial mutagénico; evitar contacto con piel y ojos. Realizar procedimientos bajo buenas prácticas de laboratorio y, si hay riesgo de aerosoles, en cabina de bioseguridad.

Ventajas clave de Reagent D

• Elimina de forma selectiva el ADN de células muertas, asegurando la detección exclusiva de organismos viables.
• Reduce significativamente los falsos positivos en PCR, mejorando la fiabilidad de los resultados.
• Compatible con una amplia gama de matrices y metodologías foodproof®.
• Certificaciones internacionales y validaciones ISO respaldan su uso en entornos regulados.

Preguntas frecuentes

¿En qué tipo de muestras se recomienda utilizar Reagent D?

Está indicado para muestras alimentarias, ambientales y cultivos de enriquecimiento donde es fundamental diferenciar entre células vivas y muertas, especialmente en matrices donde la eliminación de falsos positivos es crítica.

¿Qué sucede si se exceden los ciclos de congelación-descongelación?

Superar los tres ciclos recomendados puede comprometer la efectividad del reactivo, reduciendo su capacidad de eliminación selectiva de ADN de células muertas.

¿Es obligatorio el uso de equipos específicos para la exposición a luz?

Se recomienda utilizar foodproof® D-Light o lámparas halógenas de 500W con bloque de enfriamiento para garantizar una exposición homogénea y reproducible.

¿Tiene limitaciones en tipos de muestras?

Sí, su eficacia puede disminuir en muestras opacas o oscuras que dificulten la penetración de la luz visible.

¿El reactivo puede reemplazar los medios de cultivo?

No, Reagent D es un reactivo químico complementario y no sustituye a los medios de cultivo convencionales.

¿Qué precauciones de seguridad se deben tomar?

Debido a su fotosensibilidad y potencial mutagénico, debe manejarse bajo oscuridad, con equipo de protección personal y siguiendo estrictamente las buenas prácticas de laboratorio.