Kylt pasteurella multocida y

Aplicaciones principales

• Diagnóstico clínico de cólera aviar en aves (pollos, pavos, aves acuáticas)
• Identificación de rinitis atrófica en cerdos mediante la detección del gen toxA
• Detección de infecciones respiratorias, sistémicas y musculoesqueléticas en rumiantes
• Análisis de tejidos, órganos y diversas muestras biológicas (hisopos nasales, traqueales, cloacales, aislados culturales)
• Estudios epidemiológicos para determinar la prevalencia y distribución de cepas toxigénicas
• Monitoreo sanitario y control de enfermedades en explotaciones ganaderas
• Investigación sobre la patogenicidad de Pasteurella multocida

Especificaciones técnicas del kit

• Códigos de producto: 31334 (100 reacciones), 31335 (25 reacciones)
• Principio del ensayo: PCR en tiempo real (Real-Time PCR)
• Patógenos detectados: Pasteurella multocida (ADN) y gen toxA
• Molécula diana: ADN bacteriano
• Detección: Separada y especie-específica
• Canales de detección: FAM (520 nm, P. multocida), Cy5 (670 nm, toxA), HEX (550 nm, IAC)
• Componentes: Reaction-Mix (tapa marrón), Control Positivo (liofilizado, tapa roja), Control Negativo (tapa azul)
• Almacenamiento: ≤ -18 °C para la mayoría de componentes; controles y Reaction-Mix pueden mantenerse a +2°C a +8°C de forma opcional
• Parámetros de ciclaje: Activación de polimerasa (95 °C, 1 min), Desnaturalización (95 °C, 10 s), Annealing/extensión (60 °C, 1 min, 42 ciclos), Detección en FAM, Cy5 y HEX
• Criterios de validez: NC FAM negativo, NC HEX positivo (Ct ≤ 40), PC FAM y Cy5 positivos (Ct > 15 y ≤ 35)
• Equipamiento requerido: Termociclador Real-Time PCR compatible (FAM, HEX, Cy5), kit de extracción de ADN, microcentrífuga, vórtex, micropipetas, consumibles libres de nucleasas

Instrucciones para la preparación y uso

1. Preparar las muestras: se recomienda pooling de hasta 5 muestras por extracción de ADN (tejidos, órganos, hisopos o aislados culturales).
2. Realizar la extracción de ADN utilizando el kit recomendado (Kylt DNA Extraction-Mix II o equivalente).
3. Configurar la reacción PCR en tiempo real siguiendo las indicaciones del manual, añadiendo controles positivo y negativo.
4. Ejecutar el programa de ciclaje en el termociclador compatible.
5. Analizar los resultados según los criterios de validez especificados.

Ventajas del kit Kylt Pasteurella multocida y toxA

• Detección simultánea y diferenciada de P. multocida y toxA en la misma reacción
• Alta sensibilidad y especificidad, minimizando falsos positivos/negativos
• Resultados rápidos, fiables y reproducibles para el diagnóstico veterinario
• Amplia aplicabilidad en aves, cerdos y rumiantes, con utilidad en investigación y control sanitario

Preguntas frecuentes

¿Qué tipo de muestras se pueden analizar con este kit?

Se pueden analizar tejidos y órganos (tráquea, pulmón), hisopos (nasales, traqueales, cloacales) y aislados culturales. Se recomienda el pooling de hasta 5 muestras por preparación de ADN.

¿Es necesario un equipo específico para realizar la PCR en tiempo real?

Sí, se requiere un termociclador Real-Time PCR compatible con los canales FAM, HEX y Cy5, así como equipamiento básico de laboratorio molecular y un kit de extracción de ADN adecuado.

¿Cómo se garantiza la validez de los resultados?

El kit incluye controles positivos y negativos, y un control de amplificación interno (IAC). Los resultados son válidos si los controles cumplen los criterios de Ct especificados en el manual.

¿El kit detecta tanto la bacteria como el gen toxA de forma separada?

Sí, la detección es diferenciada: FAM indica P. multocida y Cy5 indica la presencia del gen toxA, permitiendo interpretar ambos resultados de manera independiente.

¿Para qué especies animales está recomendado el uso de este kit?

Está recomendado para aves (pollos, pavos, patos), cerdos y rumiantes (cabras, ganado vacuno y ovejas), cubriendo las principales especies afectadas por P. multocida.

¿Dónde puedo consultar el manual de uso y más información técnica?

Puede consultar el manual y detalles técnicos en la web del proveedor: https://kylt.eu/pasteurella-multocida-toxa-en