Kylt erysipelothrix rhusiopath

Aplicaciones principales

• Diagnóstico de infecciones sistémicas causadas por E. rhusiopathiae en avicultura, porcicultura y rumiantes.
• Investigación y confirmación de brotes epidémicos mediante análisis de tejidos, órganos o hisopos.
• Detección de portadores asintomáticos y monitoreo epidemiológico en rebaños.
• Apoyo en la confirmación de endocarditis bacteriana y cuadros subclínicos o crónicos.
• Identificación rápida en cultivos bacterianos mixtos o puros.

Especificaciones técnicas

• Capacidad: 25 reacciones.
• Componentes incluidos:
• qPCR-Mix (1 x 280 µl, tapa transparente)
• Primer-Probe-Mix (1 x liofilizado, 150 µl tras rehidratación, tapa naranja)
• Control Positivo (2 x liofilizado, 50 µl cada uno tras rehidratación, tapa roja)
• Control Negativo (1 x 1 ml, tapa azul)
• Almacenamiento: ≤ -18 °C. Proteger de luz y evitar ciclos repetidos de congelación-descongelación (máx. 3 ciclos).
• Certificaciones: DIN EN ISO 9001:2015.
• Equipamiento requerido: Termociclador Real-Time PCR (FAM y HEX), kit de extracción de ADN, microcentrífuga, vórtex, micropipetas, centrífuga para placas PCR, puntas con filtro PCR-clean.
• Perfil térmico: Activación polimerasa 95°C/10 min; 42 ciclos de 95°C/15 s y 60°C/1 min.
• Controles de calidad: FAM y HEX según valores de Ct especificados en el manual.
• Uso previsto: Diagnóstico in vitro veterinario exclusivamente.

Instrucciones de preparación y uso

1. Extraer y purificar ADN de alta calidad a partir de las muestras seleccionadas (tejidos, hisopos o cultivos).
2. Rehidratar los componentes liofilizados:
3. Añadir 50 µl de Control Negativo a cada vial de Control Positivo.
4. Añadir 150 µl de Control Negativo al Primer-Probe-Mix.
5. Preparar la mezcla de reacción según el protocolo del fabricante.
6. Añadir las muestras y controles a los pocillos correspondientes.
7. Ejecutar el ciclo de PCR en tiempo real siguiendo el perfil térmico recomendado.
8. Interpretar los resultados conforme a los valores de Ct en canales FAM y HEX.

Recomendación: Utilice material PCR-clean y guantes sin polvo, y cambie de guantes frecuentemente. Kits recomendados para extracción/purificación: Kylt DNA Extraction-Mix II, Kylt RNA/DNA Purification, Kylt RNA/DNA Purification HTP.

Beneficios de elegir este kit

• Máxima especificidad y sensibilidad para la detección de E. rhusiopathiae.
• Control interno de inhibidores que garantiza la fiabilidad de cada reacción.
• Compatible con una amplia variedad de tipos de muestra y especies animales.
• Cumple con estándares internacionales de calidad (ISO 9001:2015).
• Fácil integración en flujos de trabajo rutinarios de laboratorio veterinario.

Preguntas frecuentes

¿Qué tipos de muestras son compatibles con el kit?

El kit es compatible con tejidos, órganos, hisopos de distintas localizaciones y cultivos bacterianos puros o mixtos.

¿Cómo se controla la presencia de inhibidores en la reacción?

Mediante el canal HEX, que monitoriza el Control de Amplificación Interno (IAC) para detectar posibles inhibidores de PCR.

¿Cuántos ciclos de congelación-descongelación se permiten?

Se recomienda un máximo de tres ciclos para mantener la integridad de los reactivos liofilizados.

¿Es obligatorio realizar la alícuotación del producto?

La alícuotación está recomendada para uso esporádico y para evitar la degradación por ciclos repetidos.

¿Qué equipamiento adicional se necesita para el uso del kit?

Se requiere un termociclador Real-Time PCR compatible con detección FAM y HEX, además de equipos estándar de laboratorio molecular (kit de extracción de ADN, microcentrífuga, vórtex, micropipetas, puntas con filtro).

¿El kit está certificado para diagnóstico veterinario?

Sí, cumple con la normativa DIN EN ISO 9001:2015 y está destinado exclusivamente a diagnóstico in vitro veterinario.