Kylt e.coli east aida 100 reac

Aplicaciones principales

• Diagnóstico de infecciones entéricas en ganado porcino y rumiantes (bovinos, ovinos, caprinos).
• Identificación rápida de cepas de E. coli portadoras de los factores de virulencia EAST, AIDA y/o paa.
• Detección en casos de diarreas neonatales, diarrea post-destete, enfermedad del edema y enteritis.
• Vigilancia epidemiológica y caracterización de cepas circulantes en explotaciones ganaderas.
• Apoyo en el control y manejo de enfermedades a nivel de granja.
• Investigación de la patogénesis de E. coli y evaluación de estrategias terapéuticas.

Especificaciones técnicas del producto

• Tipo de ensayo: PCR en Tiempo Real (Real-Time PCR) multiplex.
• Objetivos de detección: Genes de virulencia EAST, AIDA y paa de Escherichia coli.
• Formato: 100 reacciones (Código 31714); disponible formato de 25 reacciones (Código 31715).
• Componentes incluidos: Mezclas de reacción, controles positivos y negativos, control de amplificación interno (IAC).
• Almacenamiento: ≤ -18 °C inmediatamente tras la recepción.
• Compatibilidad de termociclador: Compatible con la mayoría de cicladores PCR en tiempo real comerciales con detección FAM, HEX, Cy5 y TXR (emisiones 520, 550, 670 y 620 nm).
• Desactivación de ROX: Es necesario desactivar la normalización predeterminada contra ROX en equipos ABI.
• Asignación de fluorocromos: IAC en canal HEX; EAST, AIDA y paa en canales FAM, Cy5 y TXR (consultar DFU para asignación exacta).
• Tipo de muestra: Material de colonia o aislados puros obtenidos de procesos culturales previos.
• Extracción de ADN: Se requiere extracción de ADN de alta calidad (recomendados kits de purificación Kylt®).
• Interpretación de resultados:
• Positivo: Ct ≤ 30 en canal de patógeno específico
• IAC válido: Ct ≤ 40 (ausencia de inhibición)
• Validez de corrida: controles positivos y negativos cumplen rangos de Ct esperados
• Certificación: ISO 9001:2015; fabricado en Alemania.

Cómo utilizar el kit correctamente

1. Preparación del ADN: Extraiga ADN de alta calidad a partir de material de colonia o aislados puros, siguiendo las recomendaciones del fabricante.
2. Preparación de la mezcla de reacción: Dispense las mezclas, controles y el ADN extraído según el protocolo incluido en el kit.
3. Configuración del termociclador: Programe el equipo PCR en tiempo real con los parámetros específicos de amplificación y los canales fluorométricos requeridos.
4. Ejecución de la PCR: Inicie el ciclo de amplificación y supervise la emisión de fluorescencia en tiempo real.
5. Interpretación de resultados: Analice los valores Ct obtenidos para cada canal, validando la presencia de controles internos y externos.
6. Validación final: Confirme la validez de la corrida asegurando que los controles positivos y negativos estén dentro de los rangos esperados.

Ventajas de elegir el kit Kylt E. coli EAST AIDA

• Detección simultánea y diferenciada de múltiples factores de virulencia en una sola reacción.
• Alta sensibilidad y precisión, minimizando falsos negativos y positivos.
• Control interno de amplificación para mayor fiabilidad de los resultados.
• Fabricación bajo normas ISO 9001:2015 y soporte técnico especializado.

Preguntas frecuentes

¿Qué ventajas ofrece la multiplexación en este kit?

Permite detectar y diferenciar varios genes de virulencia de E. coli en una sola reacción, optimizando tiempo y recursos.

¿Qué tipo de muestras se pueden analizar?

El kit está diseñado para usar ADN extraído de colonias o aislados puros obtenidos tras procesos culturales previos.

¿Es compatible con todos los termocicladores en tiempo real?

Sí, es compatible con la mayoría de termocicladores comerciales que dispongan de detección en los canales FAM, HEX, Cy5 y TXR. En equipos ABI, es necesario desactivar la normalización contra ROX.

¿Cómo se asegura la validez de los resultados?

Incluye controles positivos, negativos y un control interno de amplificación (IAC) que deben cumplir los valores de Ct especificados para validar cada corrida.

¿Qué soporte técnico ofrece el proveedor?

Kylt® proporciona asesoría técnica a través de su web, correo electrónico y capacitaciones periódicas en Alemania, además de software para la evaluación de resultados.