KIT SHEEP ID 48 TESTS 48 TESTS

Aplicaciones principales

• Control de calidad y autenticidad en la industria alimentaria y de piensos
• Prevención del fraude alimentario y detección de adulteraciones en productos cárnicos de oveja
• Verificación de la trazabilidad en cadenas de producción y distribución
• Análisis de productos cárnicos procesados (cocidos, enlatados, esterilizados)
• Integración en análisis semicuantitativos junto al Imegen® Quant Species Kit (IMG-272)

Especificaciones técnicas

• Principio de detección: PCR en tiempo real (qPCR) cualitativa con sondas TaqMan™-MGB
• Objetivo molecular: ADN mitocondrial específico de Ovis aries
• Sondas de detección: FAM™ (520 nm) para oveja, VIC™ (550 nm) para IPC
• Sensibilidad: Detecta 0,01% (p/p) de carne de oveja en muestras crudas
• Especificidad: Exclusiva para ADN de oveja; sin detección cruzada con otras especies
• Volumen de reacción: 25 µL
• Equipos compatibles: Termocicladores qPCR con canales FAM™ y VIC™ (validado en Thermo Fisher Scientific 7500 FAST, StepOne™ Plus, QuantStudio™ 5)
• Componentes del kit:
• Sheep Master Mix: 360 µL (oligonucleótidos, sondas, plásmido IPC, agua libre de nucleasas)
• General Master Mix: 600 µL (dNTPs, MgCl₂, polimerasa, buffer)
• Control Positivo: 60 µL (ADN específico Ovis aries)
• Almacenamiento:
• Sheep Master Mix y Control Positivo: -20 °C
• General Master Mix: -20 °C (antes de abrir); 2-8 °C (post-apertura, protegido de la luz)
• Material adicional requerido: micropipetas, centrífuga, vortex, placas/tubos PCR, puntas filtradas, agua libre de nucleasas

Instrucciones de preparación y uso

1. Prepare la mezcla de reacción para cada muestra:
2. 7,5 µL de Sheep Master Mix
3. 12,5 µL de General Master Mix
4. 5 µL de ADN de muestra (concentración recomendada: 10 ng/µL)
5. Cargar 25 µL por pocillo o tubo de PCR.
6. Programe el termociclador con el siguiente protocolo:
7. Activación inicial: 95 °C, 10 minutos (1 ciclo)
8. Amplificación (36 ciclos):
   • Desnaturalización: 95 °C, 15 segundos
   • Alineamiento y extensión: 60 °C, 1 minuto (detección en esta fase)
9. Configure la detección de los canales FAM™ y VIC™ (utilice ROX™ como referencia pasiva si su equipo lo requiere).
10. Analice los resultados siguiendo la interpretación recomendada:
11. FAM- / VIC+: Sin detección de ADN de oveja
12. FAM+ / VIC+: Presencia de ADN de oveja
13. FAM- / VIC-: Inhibición o fallo de reacción
14. FAM+ / VIC-: Alta concentración de ADN, posible supresión IPC
15. Utilice controles negativos y positivos en cada corrida. Duplica muestras para mayor fiabilidad.

Ventajas del Kit Sheep ID frente a alternativas

• Sensibilidad superior hasta 100 veces respecto a métodos basados en ADN nuclear
• Especificidad absoluta para ADN de oveja, sin interferencias de otras especies
• Integración de control interno positivo (IPC) en cada reacción
• Aptitud para matrices complejas y productos cárnicos altamente procesados
• Validación en equipos de qPCR ampliamente utilizados
• Certificación ISO 9001 e ISO 14001 para máxima seguridad y fiabilidad

Preguntas frecuentes

¿Qué diferencia aporta el uso del ADN mitocondrial frente al nuclear?

El ADN mitocondrial permite una sensibilidad hasta 100 veces mayor, facilitando la detección en muestras con bajo contenido de ADN de oveja o en productos muy procesados.

¿Es posible detectar carne de otras especies con este kit?

No, el kit es altamente específico para ADN de oveja y no detecta ADN de cabra, vacuno, cerdo, pollo, ni ninguna otra especie.

¿Qué cantidad mínima de carne de oveja puede detectar?

Puede identificar mezclas con tan solo 0,01% (p/p) de carne de oveja en matrices crudas.

¿Se puede usar en productos cocidos o enlatados?

Sí, el kit está validado para matrices procesadas, incluyendo productos cocidos, enlatados o esterilizados.

¿Qué controles deben incluirse en cada análisis?

Se recomienda utilizar controles negativos de extracción y PCR, así como el control positivo incluido en el kit, para garantizar la fiabilidad de los resultados.

¿Con qué equipos de PCR en tiempo real es compatible?

Está validado en instrumentos Thermo Fisher Scientific (7500 FAST, StepOne™ Plus, QuantStudio™ 5) y otros sistemas equipados con canales FAM™ y VIC™.