Bax System Real-Time E.coli O157

Aplicaciones principales

• Detección rápida de E. coli O157:H7 en carne molida y recortes de res.
• Control microbiológico en productos lácteos, vegetales y frutas.
• Monitoreo de superficies ambientales en plantas procesadoras de alimentos.
• Análisis en matrices emergentes como cáñamo y cannabis.
• Implementación en programas de calidad para prevenir brotes de contaminación.

Especificaciones técnicas

• Tecnología: PCR en tiempo real con amplificación de ADN específico.
• Sensibilidad: 10⁴ UFC/mL tras enriquecimiento.
• Tiempo de análisis PCR: Aproximadamente 55 minutos.
• Tiempo total del proceso: 10 a 24 horas (incluyendo pre-enriquecimiento).
• Componentes del kit: Reactivos de lisis (proteasa y buffer), tabletas de PCR con cebadores y sondas específicas.
• Instrumentos compatibles: BAX System Q7 y X5.
• Validaciones: AOAC-PTM (#031002) para carne, NF VALIDATION AFNOR (QUA-18/04 – 03/08) para múltiples matrices.
• Tipo de resultado: Presencia/Ausencia.

Instrucciones de preparación y uso

1. Pre-enriquecimiento: Inocule la muestra (ejemplo: 375 ±37.5 g de carne en 1.5 L de caldo específico a 45°C) e incube a 42°C durante 10 a 24 horas, incluyendo controles positivos y negativos.
2. Lisis celular: Añada 20 μL del caldo enriquecido a 200 μL de buffer de lisis con proteasa. Incube 20 minutos a 37 ±2°C, luego 10 minutos a 95 ±3°C y enfríe.
3. Preparación de la PCR: Añada 30 μL del lisado a la tableta de PCR con reactivos.
4. Análisis instrumental: Coloque el tubo en el BAX System Q7 o X5 y ejecute el programa de PCR en tiempo real.
5. Interpretación de resultados: El software del sistema BAX entrega resultados como negativo, positivo, indeterminado o inválido. Resultados positivos pueden requerir confirmación adicional según ISO 16654:2001, FSIS MLG 5 o FDA BAM Chapter 4A.

Beneficios clave del sistema

• Reducción significativa del tiempo de respuesta frente a métodos tradicionales.
• Alta sensibilidad y especificidad para E. coli O157:H7 incluso en matrices complejas.
• Cumplimiento con normativas y validaciones internacionales.
• Proceso automatizado y fácil de integrar en laboratorios de control de calidad.

Preguntas frecuentes

¿El kit requiere medios de cultivo tradicionales?

No, el kit utiliza un caldo de enriquecimiento específico previo a la PCR, pero no incluye ni requiere medios de cultivo tradicionales para el análisis inicial.

¿En qué matrices está validado el método?

El sistema está validado para carne molida y recortes de res, productos lácteos, frutas, vegetales, superficies ambientales y matrices emergentes como cáñamo y cannabis.

¿Cuál es la sensibilidad mínima tras el enriquecimiento?

La sensibilidad es de 10⁴ UFC/mL después del paso de pre-enriquecimiento.

¿Qué equipos son compatibles con el kit?

El kit está diseñado para operar exclusivamente en los sistemas BAX Q7 y X5.

¿Es necesario confirmar un resultado positivo?

Sí, los resultados positivos deben confirmarse mediante métodos culturales recomendados por normativas internacionales como ISO 16654:2001 o FSIS MLG 5.

¿Cuánto tiempo total toma el análisis completo?

El proceso total, incluyendo enriquecimiento, lisis y PCR, puede completarse en un rango de 10 a 24 horas, dependiendo de la matriz y el protocolo de enriquecimiento.