Müller-Kauffmann Tetrathionate-Novobiocine Broth (MKTTn) – Medio Completo (sin Yodo-Yoduro)

Aplicaciones principales

• Detección selectiva de Salmonella spp. en muestras clínicas (heces) y en alimentos como lácteos, cárnicos, avícolas y vegetales.
• Cumplimiento de protocolos normativos según ISO 6579-1:2017, FDA y farmacopeas internacionales (USP/EP/JP).
• Control de calidad en industrias alimentarias, farmacéuticas, cosméticas y de bebidas.
• Investigación y desarrollo para validación de métodos de detección de Salmonella en laboratorios de referencia.

Especificaciones técnicas

• Referencia de proveedor: BK208HA
• Presentación: Polvo deshidratado, 500 gramos
• Proveedor: Biokar Diagnostics (Grupo Solabia)
• pH final: 8.0 ± 0.2 a 25°C
• Apariencia del polvo: Homogéneo, beige a verde claro
• Apariencia reconstituido: Líquido opaco verde claro, con precipitado blanco
• Dosis de uso: 89.5 g/L (solo base BK208HA)
• Composición típica por litro:
• Peptona: 4.3 g
• Extracto de carne: 4.3 g
• Extracto de levadura: 3.0 g
• Cloruro de sodio: 4.3 g
• Tiosulfato de sodio: 30.0 g
• Bilis de buey: 1.6 g
• Carbonato de calcio: 10.0 g
• Verde brillante: 0.01 g
• Novobiocina: 40 mg (añadir como suplemento)
• Control de calidad según ISO 11133:2014:
• Salmonella enterica ATCC 14028: Crecimiento abundante
• Escherichia coli ATCC 25922 y Enterococcus faecalis ATCC 29212: Crecimiento inhibido o parcial
• Almacenamiento: Polvo de 2°C a 25°C en envase original cerrado y protegido de la luz. Medio preparado: 2°C a 8°C, hasta 2 semanas.
• Vida útil: Según la etiqueta del fabricante (polvo)
• Cumple con: ISO 6579-1:2017, ISO 11133:2014

Instrucciones de preparación y uso

1. Suspender 89.5 gramos de polvo en 1 litro de agua destilada o desionizada.
2. Mezclar bien y calentar suavemente hasta ebullición para disolver completamente.
3. Enfriar la solución a menos de 45°C.
4. Preparar la solución yodo-yoduro disolviendo 25 g de KI en 10 mL de agua, añadir 20 g de I₂ y completar a 100 mL con agua estéril.
5. Añadir 20 mL de esta solución yodo-yoduro por cada litro de medio MKTTn.
6. Incorporar el suplemento de novobiocina (ej. BS05608 Biokar) para alcanzar una concentración final de 40 mg/L.
7. Inocular típicamente 1 mL del pre-enriquecimiento en 10 mL de MKTTn según ISO 6579-1.
8. Incubar a 41.5°C ± 1°C (o 42°C ± 1°C) durante 18-24 horas, pudiendo extenderse hasta 48 horas si es necesario.
9. Subcultivar en agar selectivo (XLD, Hektoen o Verde Brillante) para aislamiento de colonias.
10. Confirmar posibles Salmonella mediante pruebas bioquímicas y serológicas.

Ventajas del caldo Muller-Kauffmann TTN+Novobiocina

• Alta selectividad para Salmonella spp. en presencia de flora mixta.
• Cumplimiento estricto de normativas internacionales ISO y FDA.
• Fórmula optimizada para minimizar falsos positivos por Proteus spp.
• Facilidad de preparación y uso en laboratorios de rutina y referencia.

Preguntas frecuentes

¿Qué cantidad de polvo se requiere para preparar un litro de medio?

Se deben utilizar 89.5 gramos de base deshidratada BK208HA por cada litro de agua destilada o desionizada.

¿Por qué se añade novobiocina y solución yodo-yoduro?

La novobiocina inhibe Proteus spp., mientras que el yodo-yoduro activa el tiosulfato para formar tetrationato, agente selectivo clave contra bacterias no Salmonella.

¿Qué estándares cumple este medio de cultivo?

Cumple con ISO 6579-1:2017, ISO 11133:2014 y está reconocido por farmacopeas internacionales (USP/EP/JP), además de protocolos FDA.

¿Cuánto tiempo puede almacenarse el medio preparado?

Hasta dos semanas en refrigeración (2°C a 8°C), siempre que se mantenga en condiciones estériles.

¿Qué controles de calidad se realizan para garantizar el desempeño del medio?

El producto se valida frente a cepas de referencia (Salmonella enterica ATCC 14028, E. coli ATCC 25922 y E. faecalis ATCC 29212) según ISO 11133:2014.

¿Es adecuado para matrices altamente contaminadas?

Sí, su alta selectividad y la inclusión de inhibidores permiten el aislamiento eficiente de Salmonella incluso en matrices con flora mixta y carga microbiana elevada.