Lactose-Sulfite (LS) Broth

Aplicaciones principales

• Detección y confirmación selectiva de Clostridium perfringens en productos alimenticios.
• Identificación de C. perfringens en muestras de origen animal.
• Optimización del análisis microbiológico bajo protocolos ISO 7937.
• Enumeración cuantitativa y específica de formas vegetativas y esporuladas de C. perfringens.

Especificaciones técnicas

• Formato: 7 tubos precargados de 9 mL con tubos de Durham listos para usar.
• Referencia de proveedor: BM19208.
• Código base deshidratada: BK140HA (500 g).
• Composición por litro:
• Triptona: 4,44 g
• Extracto de levadura: 2,22 g
• Clorhidrato de cisteína: 0,27 g
• Lactosa: 8,89 g
• Cloruro de sodio: 2,22 g
• Metabisulfito de sodio: 0,67 g
• Citrato férrico amónico: 0,56 g
• pH: 7,1 ± 0,2 a 25°C
• Esterilización: 121°C durante 15 minutos en autoclave
• Incubación: 46°C durante 18-24 horas en baño de agua
• Interpretación de resultados:
• Producción de gas: mínimo ¼ del volumen del tubo de Durham en 24 h
• Formación de precipitado negro/gris (sulfuro de hierro)
• Control de calidad:
• Cepas positivas: Clostridium perfringens WDCM 00007, WDCM 00080
• Cepa negativa: Clostridium bifermentans ATCC® 19299
• Almacenamiento:
• Deshidratado: 2-30°C
• Listo para uso: 2-8°C, protegido de la luz

Instrucciones de preparación y uso

1. Regeneración: Caliente los tubos a 100°C durante 10 minutos y deje enfriar a temperatura ambiente.
2. Inoculación:
3. Re-inocule 5 colonias negras aisladas de agar TSC en tubos de Tioglicolato con Resazurina (BK017 o BM082).
4. Incube en condiciones anaeróbicas a 37°C durante 18-24 horas.
5. Inocule 5 gotas del cultivo en cada tubo de LS Broth.
6. Invierta los tubos de Durham para eliminar burbujas de aire antes de la incubación.
7. Incubación: Incube a 46°C durante 18-24 horas en baño de agua controlado.
8. Interpretación: Observe la producción de gas y la formación de precipitado negro para confirmar la presencia de C. perfringens.

Beneficios de utilizar Lactose-Sulfite (LS) Broth

• Cumple rigurosamente con la norma NF EN ISO 7937 para recuento de C. perfringens.
• Reduce la necesidad de pruebas confirmativas adicionales, optimizando tiempos de laboratorio.
• Formato listo para usar, que simplifica la manipulación y reduce errores.
• Alta especificidad y sensibilidad gracias a su formulación selectiva.

Preguntas frecuentes

¿Para qué tipo de muestras es adecuado el LS Broth?

Está indicado para muestras alimentarias y biológicas de origen animal en las que se sospecha la presencia de Clostridium perfringens.

¿Qué indica la formación de un precipitado negro?

La formación de un precipitado negro de sulfuro de hierro indica la reducción de sulfitos por C. perfringens y confirma su presencia.

¿Es necesario realizar pruebas adicionales tras el uso de LS Broth?

Generalmente, no. El medio está diseñado para proporcionar confirmación directa, eliminando pasos adicionales según el protocolo ISO 7937.

¿Cómo debe almacenarse el LS Broth listo para usar?

Debe conservarse entre 2 y 8°C, protegido de la luz.

¿Qué controles de calidad se recomiendan para este medio?

Se recomienda utilizar cepas positivas de Clostridium perfringens (WDCM 00007, WDCM 00080) y la cepa negativa Clostridium bifermentans ATCC® 19299 para validar el desempeño del medio.

¿Dónde puedo obtener la documentación técnica y de seguridad?

Las hojas de datos técnicos (TDS) y de seguridad (SDS) están disponibles a través de distribuidores autorizados y en el sitio web de Solabia.