Kylt® streptococcus suis 7 ld

Aplicaciones principales

• Diagnóstico de Streptococcus suis serotipo 7 en laboratorios veterinarios.
• Detección específica de serotipos para estudios epidemiológicos y gestión de brotes.
• Monitoreo y vigilancia sanitaria de cerdos en granjas.
• Análisis de tejidos (amígdalas, bazo, pulmón, cerebro, hígado, riñón), hisopos y aislados bacterianos.
• Diagnóstico diferencial en casos clínicos como meningitis, septicemia y artritis en lechones.
• Cribado de animales portadores para estrategias de vacunación y tratamiento.

Especificaciones técnicas

• Tecnología: Real-Time PCR (qPCR)
• Detección: ADN bacteriano de Streptococcus suis serotipo 7
• Genes diana: gen específico para S. suis serotipo 7 (canal FAM, 520 nm) y beta-Actina (control interno, canal HEX, 550 nm)
• Tipo de sonda: TaqMan
• Volumen de reacción: 20 µl (16 µl Reaction-Mix + 4 µl muestra/control)
• Tiempo de amplificación: ~60 min (10 min activación + 42 ciclos de 15 s desnaturalización y 1 min anillamiento/extensión)
• Almacenamiento: ≤ -18°C (excepto control negativo, +2°C a +8°C)
• Equipos compatibles: Termocicladores qPCR con detección FAM y HEX; desactivar normalización ROX si aplica
• Criterios de validez:
• Control negativo: Ct > 35 (negativo en ambos canales)
• Control positivo: Ct > 15 y ≤ 35 (positivo en ambos canales)
• Muestra positiva: Ct ≤ 42 (FAM positiva)
• Muestra negativa: Ct ≤ 40 (HEX positiva y FAM negativa)
• Muestra inhibida: ambas curvas negativas (repetir con dilución 1:10)
• Certificación: ISO 9001:2015
• Limitaciones: Detección cualitativa, sin datos públicos sobre sensibilidad/especificidad, posible inhibición en muestras complejas

Instrucciones de preparación y uso

1. Prepare la muestra mediante homogeneización de tejidos o remojo de hisopos.
2. Extraiga el ADN utilizando un kit validado, como Kylt® RNA/DNA Purification.
3. Configure la reacción añadiendo 16 µl de Reaction-Mix y 4 µl de muestra, control positivo o negativo en cada tubo, para un volumen total de 20 µl.
4. Realice la amplificación en un termociclador qPCR compatible utilizando el perfil Kylt® Profile II (o I).
5. Analice los resultados y valide las corridas según los criterios específicos del kit.

Beneficios de utilizar el kit Kylt® Streptococcus suis 7 LD

• Permite una detección altamente específica y diferenciada del serotipo 7 de S. suis, crucial para la toma de decisiones clínicas y epidemiológicas.
• Incorpora control interno de beta-Actina para verificar la calidad de la muestra y evitar falsos negativos por inhibición.
• Compatible con la mayoría de termocicladores qPCR comerciales, facilitando su integración en laboratorios existentes.
• Incluye controles positivos y negativos para asegurar la validez de cada corrida y una interpretación confiable de resultados.

Preguntas frecuentes

¿Qué tipo de muestras puede analizar el kit?

El kit está diseñado para analizar tejidos porcinos (amígdalas, bazo, pulmón, cerebro, hígado, riñón), hisopos (nasales, amigdalinos, cerebrales) y aislados bacterianos.

¿El kit detecta otros serotipos de Streptococcus suis?

No, el kit es específico para el serotipo 7 de Streptococcus suis. No detecta otros serotipos.

¿Qué controles incluye el kit para garantizar la validez de los resultados?

Incluye control positivo (ADN liofilizado del serotipo 7), control negativo y control interno de beta-Actina para asegurar la validez de la reacción y la calidad de la muestra.

¿Se requiere un equipo qPCR específico para usar este kit?

No, es compatible con cualquier termociclador qPCR comercial que permita la detección en los canales FAM (520 nm) y HEX (550 nm). Es necesario desactivar la normalización ROX si está presente.

¿El kit ofrece resultados cuantitativos?

No, la detección es cualitativa. El kit indica presencia o ausencia del ADN del serotipo 7, pero no cuantifica la carga bacteriana.

¿Qué hacer si la muestra resulta inhibida?

Si ambas curvas son negativas, se recomienda repetir la reacción con una dilución 1:10 de la muestra extraída para reducir posibles inhibidores.