Kylt avian reovirus rt-qpcr

Aplicaciones principales

• Diagnóstico clínico y patológico de ARV en tejidos, órganos e hisopos de aves afectadas.
• Confirmación y caracterización de cultivos virales y cepas aisladas.
• Vigilancia epidemiológica en explotaciones avícolas para el monitoreo y control de la diseminación del ARV.
• Evaluación de la eficacia vacunal y respuesta inmunitaria frente al ARV.
• Apoyo a la toma de decisiones en gestión de brotes, bioseguridad y programas de vacunación.
• Diagnóstico veterinario in vitro en aves de corral.

Especificaciones técnicas

• Patógeno objetivo: Orthoreovirus Aviar (ARV)
• Molécula objetivo: ARN viral
• Tecnología: RT-qPCR dúplex, detección en tiempo real
• Control interno: Beta-actina (gen endógeno del huésped)
• Muestras compatibles: Tejidos, órganos, hisopos, aislados de cultivos (máx. 5 muestras por extracción)
• Canales de detección: FAM (520 nm) para ARV, HEX (550 nm) para control interno
• Perfil térmico:
• Transcripción inversa: 50°C, 10 min
• Activación polimerasa: 95°C, 1 min
• 42 ciclos: Desnaturalización 95°C, 10 s; Anillamiento/extensión 60°C, 1 min (detección)
• Formato: 100 reacciones (LD 100), alternativa: LD 25 (código 31210)
• Componentes: RT-qPCR Mix, Detection Mix liofilizado, control positivo, control negativo
• Almacenamiento: ≤ -18°C, máx. 3 ciclos de congelación-descongelación, proteger Detection Mix de la luz
• Equipos requeridos: Termociclador compatible FAM/HEX, kit de purificación de ARN/ADN, consumibles libres de nucleasas
• Controles: positivo, negativo, interno (beta-actina), control de aislamiento de ARN
• Criterios de validez de corrida y de interpretación de resultados establecidos por el fabricante

Cómo utilizar el kit Kylt Avian Reovirus RT-qPCR

1. Extraiga ARN de las muestras utilizando un kit de purificación recomendado.
2. Prepare la mezcla de reacción añadiendo RT-qPCR Mix, Detection Mix, y controles según el protocolo.
3. Disponga las mezclas en placas o tubos compatibles con el equipo de PCR en tiempo real.
4. Programe el termociclador siguiendo el perfil térmico especificado.
5. Ejecute la reacción y analice los resultados según los criterios de Ct proporcionados.
6. Interprete los resultados considerando los controles positivos, negativos e internos para validar la corrida.

Beneficios clave del uso de este ensayo

• Alta especificidad y sensibilidad para la detección temprana del ARV.
• Control interno integrado para garantizar la validez de cada reacción.
• Resultados rápidos que optimizan la gestión de brotes y decisiones sanitarias.
• Cumplimiento con estándares internacionales de calidad (ISO 9001:2015).

Preguntas frecuentes

¿Qué tipo de muestras se pueden analizar con este kit?

Se pueden analizar tejidos, órganos (pulmón, tráquea, tonsilas cecales, articulaciones, hígado, proventrículo) y hisopos de estas localizaciones, así como aislados de cultivos virales.

¿El kit incluye controles para validar la reacción?

Sí. Incluye control positivo, control negativo y control interno de beta-actina para asegurar la validez de cada ensayo y la calidad de las muestras.

¿Qué equipos y consumibles son necesarios para su uso?

Se requiere un termociclador de PCR en tiempo real compatible con FAM y HEX, kit de purificación de ARN/ADN, microcentrífuga, vórtex, micropipetas, puntas con filtro y consumibles libres de nucleasas.

¿Cómo se interpretan los resultados?

La presencia de señal en el canal FAM indica ARN de ARV; el canal HEX valida la integridad de la muestra. Los resultados se interpretan según los valores de Ct y presencia/ausencia de controles definidos por el fabricante.

¿Cuánto tiempo toma obtener los resultados?

El procedimiento completo, incluida la extracción de ARN y la RT-qPCR, permite resultados en pocas horas, facilitando el diagnóstico oportuno.

¿El kit es adecuado para vigilancia epidemiológica?

Sí, está especialmente indicado para la vigilancia y el control de la diseminación del ARV en explotaciones avícolas.