Brilliant Green Agar (Edel and Kampelmacher)

Aplicaciones principales

• Aislamiento de Salmonella spp. en muestras de alimentos como lácteos, carnes, huevos y procesados.
• Control de calidad y monitoreo de brotes en la industria alimentaria.
• Análisis de muestras de agua potable y aguas residuales como indicador de sanidad ambiental.
• Uso en laboratorios clínicos y veterinarios para el diagnóstico de salmonelosis en muestras biológicas.
• Medio de aislamiento secundario tras enriquecimiento en caldos selectivos.
• Detección de cepas en bajas concentraciones o con requerimientos nutricionales especiales.

Especificaciones técnicas

• Composición por litro:
• Triptona: 10,0 g
• Extracto de carne: 5,0 g
• Extracto de levadura: 3,0 g
• Lactosa: 10,0 g
• Sacarosa: 10,0 g
• Fosfato disódico: 1,0 g
• Fosfato monosódico: 0,6 g
• Rojo fenol: 90,0 mg
• Verde brillante: 5,0 mg
• Agar bacteriológico: 14,0 g
• pH final: 6,9 ± 0,2 a 25ºC
• Presentación: Polvo deshidratado de color rosado
• Aspecto tras preparación: Tonalidad naranja-marrón
• Incubación: 37ºC, 20-24 h (hasta 48 h si es necesario)
• Control de calidad:
• Salmonella typhimurium WDCM 00031: Colonias rosas (buen crecimiento)
• Salmonella enteritidis WDCM 00030: Colonias rosas (buen crecimiento)
• Enterococcus faecalis WDCM 00087: Inhibido
• Staphylococcus aureus WDCM 00034: Inhibido
• Normativas asociadas:
• NF EN ISO 19250 (calidad del agua)
• NF EN ISO 6579-1 (microbiología alimentaria)
• Dosis de preparación: 53,7 g/litro de agua (no autoclavar)

Instrucciones de preparación y uso

Preparación del medio: 1. Disolver 53,7 gramos de Brilliant Green Agar deshidratado en 1 litro de agua destilada o desmineralizada. 2. Calentar gradualmente hasta ebullición, agitando constantemente para asegurar la disolución completa. 3. ADVERTENCIA: No autoclavar, ya que la esterilización degrada los componentes selectivos. 4. Enfriar a 44-47ºC. 5. Verter en placas estériles y dejar solidificar en una superficie plana y fría.

Inoculación e incubación: 1. Secar las placas incubándolas brevemente con las tapas parcialmente abiertas. 2. Inocular por siembra en superficie usando muestras enriquecidas previamente en caldo selectivo. 3. Incubar a 37ºC durante 20-24 horas (hasta 48 horas si es necesario).

Interpretación de resultados: – Colonias incoloras a rosadas lisas, con halo rojo: Salmonella (lactosa y sacarosa negativas) – Colonias rosadas sin proliferación: Proteus – Pequeñas colonias rosas: Pseudomonas – Colonias amarillo-verdosas con zona central: Escherichia, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter (lactosa y sacarosa positivas) – Crecimiento inhibido: Bacterias Gram positivas

Por qué elegir Brilliant Green Agar de Biokar

• Asegura alta selectividad y sensibilidad para Salmonella spp. en matrices alimentarias y ambientales.
• Cumple con normativas ISO para control de calidad en agua y alimentos.
• Protocolo sencillo y rápido, sin necesidad de autoclave.
• Apoyo técnico y documentación completa de fabricante referente en medios de cultivo.

Preguntas frecuentes

¿Por qué no se debe autoclavar este medio?

El autoclave degrada los componentes selectivos (verde brillante y rojo fenol), reduciendo la eficacia y selectividad del medio.

¿Qué volumen se puede preparar con un envase de 500 g?

Con 500 g pueden prepararse aproximadamente 9,3 litros de medio, empleando 53,7 g por litro.

¿Qué hace diferencial a este medio respecto a otros agares verdes brillantes?

La formulación Edel & Kampelmacher optimiza la recuperación de Salmonella sin disminuir la selectividad, mejorando la detección en muestras complejas.

¿Qué controles de calidad deben realizarse?

Debe comprobarse el crecimiento de Salmonella typhimurium y S. enteritidis, así como la inhibición de Enterococcus faecalis y Staphylococcus aureus.

¿El medio puede emplearse como único paso en el aislamiento de Salmonella?

No se recomienda, es preferible usarlo tras una etapa de enriquecimiento selectivo en caldo para mejorar la sensibilidad y evitar falsos negativos en muestras con baja carga bacteriana.